偶氮甲烷(氧化偶氮甲烷),英文Azoxymethane,縮寫AOM,可有效誘導大小鼠結腸癌,廣泛用作一種基質引起實驗動物發(fā)生結腸腫瘤,從而研究癌癥預防物和癌癥形成機制。另外,越來越多結腸癌病例的發(fā)生,使得癌癥預防物的研究也越來越流行。按照每周一次皮下注射AOM(15mg/kg體重)進入大鼠體內,連續(xù)3周給藥。數周后能觀察到癌前期病變。
作用機制:偶氮甲烷(AOM)能誘導DNA產生O6-甲基鳥嘌加合物,導致G→A轉化。
主要應用:偶氮甲烷(AOM)常聯合DSS(Mw:36000-50000 Da)注射動物,建立結腸癌模型,用來研究癌癥發(fā)展機制和化學預防。
DSS溶液制備(2.5% DSS溶液):稱取2.5g DSS溶于100ml無菌水,本溶液置于4℃可穩(wěn)定保存1周。現配現用。
AOM溶液制備:用無菌水溶解AOM配制10 mg/ml的儲存液,分裝后放到-20℃保存,避免反復凍融。AOM在水或生理鹽水中的穩(wěn)定性高于PBS緩沖液,且在玻璃管內穩(wěn)定性好于塑料管。使用之前,融化分裝母液并用無菌生理鹽水1:10倍稀釋。
小鼠結腸癌造模方法:推薦劑量為腹腔注射AOM工作液(劑量10mg/kg體重,則10g體重小鼠注射100ul工作液)一周以 后,給予 2%DSS 飲用 7 天,誘導結直腸癌
AOM誘導腫瘤圖示
內窺鏡腫瘤調研。通過迷你腔鏡監(jiān)測AOM誘導的腫瘤形成情況。a)還能用于縱向研究;b)對于腫瘤負荷分析,每只小鼠的腫瘤大小按照預設的時間點記錄并做總和。
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